Invitrogen NativePAGE Bis-Tris凝胶系统是一种预制聚丙烯酰胺小型凝胶系统，可对非变性蛋白和蛋白复合物进行灵敏的高分辨率分析、分子量估算和纯度评估。该系统由Schägger和von Jagow在蓝色非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(BN PAGE)技术的基础上开发而成，具有近中性的操作pH和去污剂兼容性，突破了传统非变性电泳的限制。

NativePAGE Bis-Tris凝胶的工作原理

在SDS-PAGE中，SDS充当电荷转移分子，它可以让蛋白带净负电荷，从而使蛋白变性并向阳极迁移。BN PAGE采用考马斯G-250染料作为电荷转移分子，该染料附着在蛋白上使其带净负电荷，同时保持蛋白处于非变性、天然状态。NativePAGE Bis-Tris凝胶系统具有近中性pH环境，可以为蛋白和凝胶基质提供较大稳定性，从而对非变性膜-蛋白复合物进行高度灵敏的分析，且相对于传统Tris-glycine凝胶系统能够提供出色的条带分辨率。

我们推荐使用用于传统湿转印的NuPAGE转印缓冲液和PVDF，以将蛋白转印到膜上。NuPAGE转印缓冲液可维持电泳过程中建立的中性pH环境。硝酸纤维素膜与印迹膜不兼容，因为硝酸纤维素膜与考马斯G-250染料结合得非常紧密。或者，也可使用Invitrogen Power Blotter (PB0013)进行快速半干转印或使用带PVDF膜的iBlot 2凝胶转印仪(IB21001)进行快速干转印。

NativePAGE Bis-Tris预制胶系统的优势包括：

• 宽分子量分析范围：15–10,000 kDa

• 中性pH分离，能够更好地保持蛋白复合物的非变性状态

• 可分离凝胶中不同等电点(pI)的所有蛋白

• 能够在非变性构象中对膜-蛋白复合物进行分析

• 能获得比传统tris-甘氨酸非变性电泳更高的分离度