Invitrogen NativePAGE Bis-Tris 凝胶系统是一种预制聚丙烯酰胺小型凝胶系统，可对非变性蛋白和蛋白复合物进行灵敏的高分辨率分析、分子量估算和纯度评估。该系统由 Schägger 和 von Jagow 在蓝色非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 (BN PAGE) 技术的基础上开发而成，具有近中性的操作 pH 和去污剂兼容性，突破了传统非变性电泳的限制。

NativePAGE Bis-Tris 凝胶的工作原理

在 SDS-PAGE 中，SDS 充当电荷转移分子，它可以让蛋白带净负电荷，从而使蛋白变性并向阳极迁移。BN PAGE 采用考马斯 G-250 染料作为电荷转移分子，该染料附着在蛋白上使其带净负电荷，同时保持蛋白处于非变性、天然状态。NativePAGE Bis-Tris 凝胶系统具有近中性 pH 环境，可以为蛋白和凝胶基质提供较大稳定性，从而对非变性膜-蛋白复合物进行高度灵敏的分析，且相对于传统 Tris-glycine 凝胶系统能够提供出色的条带分辨率。

我们推荐使用用于传统湿转印的 NuPAGE 转印缓冲液和 PVDF，以将蛋白转印到膜上。NuPAGE 转印缓冲液可维持电泳过程中建立的中性 pH 环境。硝酸纤维素膜与印迹膜不兼容，因为硝酸纤维素膜与考马斯 G-250 染料结合得非常紧密。或者，也可使用 Invitrogen Power Blotter (PB0013) 进行快速半干转印或使用带 PVDF 膜的 iBlot 2 凝胶转印仪 (IB21001) 进行快速干转印。

NativePAGE Bis-Tris预制胶系统的优势包括：

•宽分子量分析范围：15–10,000 kDa

• 中性pH分离，能够更好地保持蛋白复合物的非变性状态

• 可分离凝胶中不同等电点(pI)的所有蛋白

•能够在非变性构象中对膜-蛋白复合物进行分析

• 能获得比传统tris-甘氨酸非变性电泳更高的分离度